退火温度

退火温度（Annealing Temperature） 是指引物和模板结合时候的温度参数，当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度。它是影响PCR特异性的较重要因素。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火， 同时还要足够高，以减少非特异性结合。

简介

退火温度（AnnealingTemperature）是指引物和模板结合时候的温度参数，当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度。它是影响PCR特异性的较重要因素。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火，同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般设定比引物的Tm低5℃。

结合可能

在模板变性后温度快速冷却至40℃～60℃（某个退火温度）的时候，可使引物和模板发生结合。由于模板DNA比引物复杂得多，引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞，这就使PCR后期的过程成为可能。

温度时间

退火温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，还有靶基序列的长度。对于20个核苷酸，G+C含量约50%的引物，55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度：

Tm值（解链温度）=4（G+C）+2（A+T）

复性温度=Tm值-（5～10℃）

在Tm值允许范围内，选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合，提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30～60sec，足以使引物与模板之间完全结合。

退火温度对异步轧制铜铝复合板的影响

不同退火温度对双相钢组织和性能的影响

（1）试验钢的Ac1和Ac3分别为687℃和785℃，Ms、Mf分别为387℃和243℃，随着退火温度的升高，马氏体含量增加，铁素体含量减少。试验钢屈服强度与抗拉强度都随退火温度的升高而提升，但是当退火温度高于740℃以后，屈强比持续上升，说明屈服强度要比抗拉强度增加幅度大，伸长率随之下降，这主要是由于马氏体含量增加所致；

退火温度对溅射铝膜结构与电性能的影响